SDSを含む転写バッファーを使用したり、強めの電気条件で転写すると、プレステインドスタンダードのバンドのような親水性の高いタンパク質は膜を抜けてしまうことがあるようです。
目的タンパク質の転写に支障のない範囲内で、次のようなマイルドな転写条件をお試しください。
・SDSを含まない転写バッファーに変更する
・転写時間を短くする
・転写の電気条件を弱くする
なお、一例として次のような条件で転写すると、プレステインドスタンダードを泳動したミニプロティアンTGXゲルでも、膜上でバンドを確認できるように転写することができます。
＜転写装置＞
タンク式（ミニトランスブロットセルの場合）
100V定電圧、30-40分
セミドライ式（トランスブロットSDの場合）
15V定電圧、15-20分
＜転写バッファー＞
Towbin buffer : 25mM Tris, 192 mM glycine, 20% MeOH, pH8.3
| [ミニプロティアンTGXゲルプレキャストゲル] [ミニプロティアンTGXゲル] 転写効率がよいそうですが、具体的にはどのような電気条件でブロッティングを行えばよいですか？ |