シルバーステインプラスキットに関する質問集

質問 ID: 3865

[シルバーステインプラスキット] どのような原理でバンドの染色が行われていますか?

回答

シルバーステインプラスキットは、Gottliev と Chavko の開発した方法に基づいた銀染色キットです。
基本的には、次のような原理で染色が行われています。

1) メタノール酢酸によるタンパク質の固定
2) 酢酸の洗浄、除去
3) 銀イオンの添加
・タングステン珪酸に結合した銀イオン-アミン錯体を添加
・イオン交換的、求電子的な相互作用により、銀イオン錯体からタンパク質へ銀イオンが移動
4) 塩基性pHにおいて、ホルムアルデヒドが銀イオンを還元して金属銀となる(これによりバンドが識別できるようになる)
5) 酢酸を添加してpHを下げることで、還元反応を止める

この銀染色方法は酸化過程を含まないので、糖タンパク質やIEFゲルの染色に用いることはできません。
その一方で、ゲル中のバンドを切り出して、質量分析によるタンパク質同定を行うことが可能です。

Gottlieb, M. and Chavko, M., Analytical Biochemistry, 165, 33-37 (1987).

関連項目