ポリアクリルアミド電気泳動(PAGE)全般に関する質問集

質問 ID: 389

[PAGE全般] SDS-PAGEを行うと、シングルバンドで出ると考えられるタンパク質が2本のバンドに分かれてしまいます。

回答

以下の原因から、サンプルの還元が不十分であった可能性が考えられます。

1)サンプルバッファーに含まれる還元剤が劣化している。
 還元剤は経時的に劣化していきます。
 2-メルカプトエタノールやDTTなどの還元剤とサンプルバッファーとの混合は用時調製をしてください。
 また、調製前の試薬そのものが劣化している場合は、試薬を交換してください。

2)還元剤の量が不足している。
 サンプルバッファー中の還元剤の量を増やしてみてください。
 161-0737 Laemmliサンプルバッファー使用時の標準的な還元剤の終濃度は次のようになります。
 ・2-メルカプトエタノールの場合 5%(710mM)
 ・DTTの場合 350mM(54mg/ml)