この方法は、メンブレンをセットする陽極側にメタノールを含むTris-CAPSバッファーを、ゲルをセットする陰極側にSDSを含むTris-CAPSバッファーを用いてブロッティングする方法です。メタノールによるメンブレンへのタンパク質の親和性を高める効果と、SDSによるゲルからタンパク質を溶出しやすくする効果を期待できます。
例えば、8x10cmのゲルをブロッティングする場合、120mA定電流で30-60分ブロッティングします。
陽極バッファー: 60mM Tris, 40mM CAPS , 15% メタノール (pH9.6)
陰極バッファー: 60mM Tris, 40mM CAPS , 0.1% SDS (pH9.6)
手順の詳細はBulletin2134をご参照ください。