ゲルろ過カラムを2本連結するだけで分離度が改善

ゲルろ過クロマトグラフィー（Size Exclusion Chromatography, 以下SEC）は、分子の大きさに応じて樹脂の内部に浸透する深さの違いを利用し、分子の大きいものから小さい順に溶出します。そのため、SECは分画、精製分離だけでなく、分子量の推定にも使用されています。

一般的なクロマトグラフィーでは、pHや塩濃度、流速などを変更して精製条件を検討する必要がありますが、SECではカラムを長くすることで分離を向上することができます。今回紹介する技術資料は中圧用SECカラムENrich™ SEC 650カラムを1本使用する場合と2本連結した時におけるγ-グロブリン凝集体の分離状況を比較しました。

ENrich™ SEC 650カラム1本の時にはγ-グロブリンの凝集体のピーク(矢印)はチオグロブリンのピークと重なっていますが（図１、中段、下段）、2本連結した場合は、チオグロブリンとγ-グロブリンの間にピークが存在し、分離されました (図1　上段、表 1)。このように、ゲルろ過カラムを連結するだけで、簡単に分離能を向上することができます。