プロテインアッセイ 全般に関する質問集

質問 ID: 2832

[プロテインアッセイ 全般] Lowry法の原理はどのようなものですか?

回答

タンパク質溶液をアルカリ性条件下でCu2+と反応させ、その反応物をFolin 試薬を加えると、Cu+によってリンモリブデン酸-タングステン酸コンプレックスが還元され青色を呈色します。

発色は、ペプチド結合およびチロシン、トリプトファン、シスチン、システイン、ヒスチジンなどのアミノ酸により起こります。

タンパク質はFolin 試薬の還元を受けて1、2 または3 個の酸素原子を喪失し、それによって750nm で最高、405nm で最低の吸光度を示す特徴的な青色を呈する還元物質が生成されます。