質問 ID:3505
[ChemiDoc XRS Plus] Image lab version 4 で操作しています。
化学発光の画像と可視スタンダードの画像を重ね合わせて、分子量を推量することができますか?
化学発光の画像と可視スタンダードの画像を重ね合わせて、分子量を推量することができますか?
回答
専用の撮影条件を使用した場合に限り、重ねあわせが可能です。
以下の方法で撮影を行ってください。
なお、ソフトウェアのバージョンにより操作が異なります。
本トピックはImage Lab Version4.x用となりますので、ソフトウェアのバージョンをご確認の上、他のバージョンをご利用の場合は関連トピックをご参照ください。
方法
1) 画像の撮影条件の選択画面でApplication> Custom> Manage Custom Applicationを選択します。
2) Manage Custom Applicationの画面でNew のボタンをクリックします。
3) 新規条件の作成 (Create Custom Application)で以下の2つの撮影条件を作成します。
Application Name: Standard 2x2
Light source: White Epi illumination
Filter: No Filter
Image Color: Gray
Binning: 2x2
Application Name: Standard 3x3
Light source: White Epi illumination
Filter: No Filter
Image Color: Gray
Binning: 3x3
4) 化学発光を先にApplication> Blot> Chemi (またはChemi Hi Resolution)のモードで撮影します。
このとき、撮影エリア(Imaging Area)に表示される大きさをメモしておきます。
5) 化学発光撮影後、サンプルは動かさず、Application>Custom> Standard 3x3 (化学発光をChemi Hi Resolutionで撮影した場合は Standard 2x2) を選択します。
撮影エリアの設定が化学発光の時と変わっている場合は、同じ大きさに変更します。
6) 可視スタンダードの画像を露光時間設定をAutomatically optimize the Exposure time (Intense band)で撮影します。
7) 撮影したChemiとStandard の2枚の画像を同時に開きます。
8) 画面左側のメニューからImage Toolをクリックし、さらにMerge を選択します。
9) 重ね合わせをする画像のリストが表示されたらOKをクリックします。
10) 2枚の画像が重ねあわされた合成画像が表示されます。
なお、この合成画像については分子量の算出のみに用い、定量解析は合成前のイメージを使用するようにしてください(合成画像については、定量性が維持されていません)。
以下の方法で撮影を行ってください。
なお、ソフトウェアのバージョンにより操作が異なります。
本トピックはImage Lab Version4.x用となりますので、ソフトウェアのバージョンをご確認の上、他のバージョンをご利用の場合は関連トピックをご参照ください。
方法
1) 画像の撮影条件の選択画面でApplication> Custom> Manage Custom Applicationを選択します。
2) Manage Custom Applicationの画面でNew のボタンをクリックします。
3) 新規条件の作成 (Create Custom Application)で以下の2つの撮影条件を作成します。
Application Name: Standard 2x2
Light source: White Epi illumination
Filter: No Filter
Image Color: Gray
Binning: 2x2
Application Name: Standard 3x3
Light source: White Epi illumination
Filter: No Filter
Image Color: Gray
Binning: 3x3
4) 化学発光を先にApplication> Blot> Chemi (またはChemi Hi Resolution)のモードで撮影します。
このとき、撮影エリア(Imaging Area)に表示される大きさをメモしておきます。
5) 化学発光撮影後、サンプルは動かさず、Application>Custom> Standard 3x3 (化学発光をChemi Hi Resolutionで撮影した場合は Standard 2x2) を選択します。
撮影エリアの設定が化学発光の時と変わっている場合は、同じ大きさに変更します。
6) 可視スタンダードの画像を露光時間設定をAutomatically optimize the Exposure time (Intense band)で撮影します。
7) 撮影したChemiとStandard の2枚の画像を同時に開きます。
8) 画面左側のメニューからImage Toolをクリックし、さらにMerge を選択します。
9) 重ね合わせをする画像のリストが表示されたらOKをクリックします。
10) 2枚の画像が重ねあわされた合成画像が表示されます。
なお、この合成画像については分子量の算出のみに用い、定量解析は合成前のイメージを使用するようにしてください(合成画像については、定量性が維持されていません)。