以下の原因から、サンプルの還元が不十分であった可能性が考えられます。
1)サンプルバッファーに含まれる還元剤が劣化している。
還元剤は経時的に劣化していきます。
2-メルカプトエタノールやDTTなどの還元剤とサンプルバッファーとの混合は用時調製をしてください。
また、調製前の試薬そのものが劣化している場合は、試薬を交換してください。
2)還元剤の量が不足している。
サンプルバッファー中の還元剤の量を増やしてみてください。
161-0737 Laemmliサンプルバッファー使用時の標準的な還元剤の終濃度は次のようになります。
・2-メルカプトエタノールの場合 5%(710mM)
・DTTの場合 350mM(54mg/ml)