タンパク質スタンダード 全般に関する質問集

質問 ID: 1495

[タンパク質スタンダード 全般] 分子量スタンダードを用いて電気泳動したバンドのタンパク量を求めたいのですが可能ですか?

回答

基本的にはゲル上のタンパク質量を定量することはできません。
これはあらゆるタンパク質を均一に染色する方法が無いためです。
もし濃度を求めたいタンパク質と同じタンパク質について、既知濃度の精製標品を用意できるのであれば、その精製標品の希釈系列を作り、サンプルと同時に電気泳動して、バンドの染色強度から検量線を作成することで最適な結果を得ることができます。

しかし、ある程度のタンパク量の目安をつけるためであれば、バイオ・ラッド社製スタンダードの内、下記の情報を参考にしていただけます。


【プレシジョンPlusスタンダード(アンステインド)】
 10ulアプライした場合下記が含まれます(マニュアルより)。
 50kDa        約750ng
 20kDa, 100kDa    約150ng

【プレシジョンプラススタンダードプラグ(1プラグあたり)】
 10kDa       210ng
 15kDa       300ng
 20kDa       225ng
 25kDa       1200ng
 37kDa       330ng
 50kDa       1100ng
 75kDa       990ng
 100kDa       225ng
 150kDa       315ng
 250kDa       540ng


注)着色済み分子量スタンダード(プレシジョンPlus ブルースタンダードなど)は着色してある色素の影響でタンパク量に応じた染色は行われていないため、タンパク量の概算には使用できません。