プロティアンIEFセルに関する質問集

質問 ID: 2943

[プロティアンIEFセル] 泳動プログラムについて、多くのStepでは電圧と時間の設定を行いますが、Step3(タンパク質のpI値にフォーカシングするステップ)だけ Vhour(電圧x時間)で設定を行うのはなぜですか?

回答

塩濃度の高いサンプルの場合、電圧を上げるとIPGストリップに高い電流がかかってしまうのですが、50uAを超えると過剰に発熱しゲルが焦げてしまう可能性があります。そのため、プロティアンIEFセルではIPGストリップにかかる電流の上限を設定しており(初期設定では 50uA/gel)、塩濃度の高いサンプルを泳動した場合には、Step2(フォーカシングに必要な電圧まで上げるステップ)で所定の電圧まで上がらないことがあります。
もしStep3で時間のみの設定を行った場合には、電圧が不足するためにフォーカシングが不十分な結果となってしまいます。そのため電圧の不足分を時間で補うために、Step3 ではVhour(電圧×時間)で設定を行います。