サンプルバッファーに関する質問集

質問 ID: 3724

[4x Laemmliサンプルバッファー] 還元条件下のSDS-PAGEを実施する場合、どの程度の還元剤を添加すればよいですか?

回答

次のようにサンプルを調製してください。

4x Laemmliサンプルバッファー900ulに対し、2-メルカプトエタノールを100ul加えます。
1:3でサンプルと混合すると、2-メルカプトエタノールの終濃度は2.5%(355mM)となります。

DTTの場合は、サンプルと混合後の終濃度が50-100mMとなるように4x Laemmliサンプルバッファーに添加します。
例えば、DTT 31mg を4x Laemmliサンプルバッファー1mlで溶解してください。
1:3でサンプルと混合すると、DTTの終濃度は50mMとなります。

また、還元剤は劣化しやすいため、使用直前に混合して調製してください。

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