本ガイドはBio-Rad Laboratories社発行の”Flow Cytometry Basics Guide”の日本語翻訳版「フローサイトメトリー 基礎ガイド」です。
より理解を深めるため、原著にない章や記載を追加しています。
このフローサイトメトリー基礎ガイドは、背景にある複雑な数式や物理学について深くは掘り下げることなく、フローサイトメトリーの重要な基本的概要を紹介しています。
フローサイトメトリーの詳細を記述する代わりに、フローサイトメトリー初心者にとって役に立つガイドとなることを目的としています。また、フローサイトメトリーの利点について他の方に教える必要がある方のためにフローサイトメトリーの概要紹介用の資料としてもお使い頂けます。
さらに理解を深めるために、末尾にはフローサイトメトリー用語集を掲載してあります。
この章ではフローサイトメトリーの初学者向けに、以降の章で紹介されるフローサイトメトリー並びにフローサイトメーターの基本的事項について記載します。
この章では、フローサイトメーターの働きについて説明します。 細胞が機器をどのように通過するか、光がどのように検出され測定されるか、さらに、セルソーティングの基本原理を学びます。
蛍光色素（フルオロフォア）は、特定の波長を吸収し、それより長い波長の光を発する分子です。 この章では、どのように蛍光色素が機能するか、フローサイトメトリーで蛍光標識がいかに重要であるか、また、蛍光チャンネル間の補正（コンペンセーション）の方法について説明します。
フローサイトメトリーのデータは、さまざまな方法で解析することができます。 ここでは、ゲーティング戦略の一般的な例とデータの表示方法を紹介します。
コントロールは、バックグラウンドのシグナルや非特異的なシグナルから目的のデータを区別するために、あらゆる実験において重要です。 ここでは、フローサイトメトリーのためのいくつかの必須なコントロールについて議論します。
フローサイトメトリーの利点の1つは、レーザーを通過する際に単一の粒子を測定できることですが、サンプルの質が悪い場合は測定したデータの質も悪くなる可能性があります。 この章では、生存率が高い細胞懸濁液を確実に得るためのサンプルの調製と処理方法について記載します。
複雑なマルチカラーパネルを構築するのは困難です。 この章では、マルチカラーパネル実験を設計・構築するために従わなければならない基本的な規則をいくつか示します。
フローサイトメトリーには様々な用途があります。 本章では、フローサイトメトリーで現在使用されている一般的な技術について、粒子同士を区別するものから、いくつかの最近の技術までを簡単に説明します。
フローサイトメトリーによる品質データは、使用した細胞の健康状態と染色プロトコールの両方によって影響を受ける可能性があります。 ここでは、表面マーカー、細胞内マーカーおよびDNAのための一般的に使用される細胞調製技術および染色プロトコールの例を紹介します。
結果が悪い理由はたくさんあります。 ここでは、より多くの情報が必要な場合に推奨される参考書と一緒に、最良の染色を可能にするアドバイスの一般的な問題のいくつかを挙げます。